スクリーニング試験
シーズ探索・リード化合物の最適化
新薬開発過程における創薬初期段階での、薬物動態・薬理・安全性研究を支援します。
in vivo試験（PKスクリーニング）
動物（ラット、イヌ、サルなど）にリード化合物を投与し、その吸収程度、主排泄経路の概要について検討します。
in vitro試験
創薬初期段階での化合物評価をin vitro試験で検討いたします。
- 1溶解性
専用フィルターキットを用いて、PBS 等への化合物の溶解性を確認します。 - 2血漿中安定性
ヒトあるいは他の動物種の非凍結血漿を用いて、リード化合物の血漿中での安定性を確認します。 - 3蛋白結合予備検討
蛋白結合実施前にリード化合物の安定性・吸着・蛋白結合の平衡透析時間の各検討を実施します。 - 4蛋白結合
平衡透析法、限界ろ過法、超遠心法などを用いて、リード化合物のヒトまたは動物での蛋白結合率を測定します。 - 5血球移行
ヒトあるいは他の動物種の非凍結血液を用いて、血球移行率を測定します。 - 6代謝安定性及びCYP分子種推定
ヒトあるいは他の動物種の肝ミクロソームを用い、化合物に対するCYPを中心とした代謝酵素の影響を、インキュベーション前後の未変化体の減少量から評価します。また、ヒト肝ミクロソームを用いた代謝安定性試験に、各 CYP に対する特異的阻害剤を添加することにより、代謝に関与する CYP 分子種を推定します。 - 7薬物相互作用（酵素阻害スクリーニング、CYP阻害）
ヒト肝ミクロソームを用いて各CYP分子の特異的プローブ基質に対するリード化合物が与える影響から相互作用を評価します。 - 8薬物吸収（Caco-2細胞を用いた膜透過性試験）
リード化合物のヒト小腸透過性を予測するために、Caco-2細胞（ヒト大腸ガン由来）を介した薬物透過性を検討します。
生体試料中の薬物濃度測定
創薬初期段階で動物から得られた試料（血漿、組織など）をタイムリーに、LC-MS/MSを用いて濃度測定し、濃度測定の結果をご報告します。
- LBA法を用いた探索的濃度測定
弊社標準抗体を用いて、試料中の中分子～高分子化合物の濃度を測定し、測定結果をご報告します。
- バイオマーカー測定
ヒトあるいは他の動物種の血漿・血清・CSF等中のNeurofilament Litght chain（NfL）をSimoaを用いて高感度で測定します。
年間測定スケジュールを組んでおりますので、詳細はお問い合わせください。
薬理（オンターゲット、オフターゲット検索）スクリーニング試験
- オンターゲット検索
GPCRを含む各種受容体への結合を評価します。55項目及び85項目の2種類のパッケージ試験をご用意しています。
- オフターゲット検索
文献情報に基づき選択した、受容体への結合および酵素・キナーゼへの阻害を評価します。50項目及び70項目の2種類のパッケージ試験をご用意しています。
年間実施スケジュールを組んでおりますので、詳細はお問い合わせください。
カスタムで1項目から選んで実施することが可能です。
in vitro 肝毒性評価
- 1胆汁うっ滞型薬剤性肝障害試験
胆汁酸を胆管へ排泄するトランスポーターが薬剤により阻害されると、胆汁酸の細胞内への蓄積が起こり胆汁うっ滞を引き起こします。本試験系では、胆管様構造を持つサンドイッチ培養ヒト肝細胞を用いて、胆汁うっ滞型薬剤性肝障害のポテンシャルを評価します。 - 2ミトコンドリア毒性試験
ミトコンドリア毒性は、FDAにおいてblack box warningとされている化合物のうちの約80%で報告されている重要な肝毒性機序です。HepG2細胞を用いて、Crabtree効果を利用した細胞毒性評価を行うことで、ミトコンドリア由来毒性とその他の毒性を分離評価します。 - 3反応性代謝物検出
- 1システイントラップ試験
薬剤性肝障害の発生機序の一つとして、化合物の代謝過程で生じる反応性代謝物の関与が言われています。反応性代謝物は不安定でそのままの状態では検出することが困難なため、トラップ剤として35S-システインを用い、液体シンチレーションカウンターを用いて反応性代謝物の生成量を定量します。 - 2KCNトラップ試験
トラップ剤としてK14CNを用い、システインではトラップできない反応性代謝物を補足し、定量します。 - 3共有結合試験
反応性代謝物の毒性を定量的に評価するために、候補化合物のRI標識体を用いて試験を行います。ヒト肝ミクロソームまたはヒト肝細胞と一定時間インキュベーションを行い、蛋白質との共有結合量を測定します。また、ラットの肝代謝酵素を誘導させた後、RI標識化合物を投与することで、in vivoでの血漿や肝組織蛋白質との共有結合量の評価を行うことも可能です。
- 1システイントラップ試験
- 4酸化ストレス
通常、生体内で活性酸素の産生と抗酸化防御機構のバランスが取れています。しかし、薬剤の摂取などにより、酸化ストレスが引き起こされ、肝障害の一因になることが報告されています。酸化ストレスが発生するとGSHが減少し、GSSG（酸化型GSH）が上昇する特徴を有することから、HepG2細胞を用いてGSSG/GSH比を測定し酸化ストレスのリスクを評価をします。 - 5リン脂質蓄積
薬剤による生体内への脂質蓄積は、非アルコール性脂肪肝やリン脂質蓄積症を引き起こす原因の一つです。脂質蓄積マーカーとして最も評価されているリン脂質をターゲットとし、HepG2細胞を用いてリン脂質マーカーを測定することでリスクを評価します。
in vitro 腎毒性評価
薬剤性腎障害 (DIKI) は、急性腎障害、慢性腎臓病、および末期腎不全に関連する頻繁に報告される有害事象で、非臨床および臨床段階において、肝毒性に次ぐリスクを持っています。日機装株式会社より発売された プライマリーのヒト由来近位尿細管細胞を 3D 培養した 3D-RPTEC® 細胞を用いて、評価化合物の腎毒性リスクを評価します。